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技術(shù)文章 / article
動(dòng)物血清的正確熱滅活方法
2022-09-28 瀏覽次數(shù)：1118
動(dòng)物血清的熱滅活非常容易造成蛋白析出增多，若非必要，可以無(wú)需做此操作。若必須做動(dòng)物血清的熱滅活，請(qǐng)嚴(yán)格遵守以下步驟：
1、保證血清*融化狀態(tài)，溫度接近常溫。
2、保證水浴溫度56℃、30分鐘的原則，在水浴過(guò)程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使血清內(nèi)部受熱均勻，直至滅活時(shí)間結(jié)束。
注意事項(xiàng)：
溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多，甚至嚴(yán)重影響血清的品質(zhì)。在56℃水浴中，持續(xù)恒溫30分鐘。在此過(guò)程中每隔2-3分鐘搖晃瓶子，使其受熱均勻，減少蛋白的析出。
為什么要熱滅活血清？
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞，昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。
實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)，或沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察，像是小黑點(diǎn)，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量!
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