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        143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞

        2020-06-08 瀏覽次數(shù):1367

        143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞

        細(xì)胞名稱

        143B 人骨肉瘤細(xì)胞

        貨號

        H002

        種屬

        細(xì)胞來源

        從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)

        生長特性

        貼壁 上皮樣

        培養(yǎng)條件

        培養(yǎng)基:90%DMEM(H)+10%FBS

        溫度:37℃     氣相:95%空氣,5%二氧化碳

        傳代

        1.用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進(jìn)行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;

        2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進(jìn)行傳代,傳代比例為1:3到1:6;

        3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第D一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為D佳消化時間,記錄D佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。

        保存

        凍存條件:80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

        (備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞,不能預(yù)熱后使用。)

        保存條件:液氮存儲

        供應(yīng)限制

        經(jīng)供研究之用

        常見問題及解決方案

        1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。

        2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加 10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間長不宜超過 72 小時)

        3.細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時后觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

         

        143B細(xì)胞人骨肉瘤細(xì)胞

         

        常見熱賣細(xì)胞:

        HeLa 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        143B 人骨肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        293T 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        A2780 人卵巢癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        A549 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        A673 人尤因肉瘤細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 多邊形

        AGS 人胃腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

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        C33A 人宮頸癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        CACO2 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 DMEM+20% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        COLO205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 半懸浮 上皮細(xì)胞樣

        DU145 人前列腺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        H1650 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        H460 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HACAT 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 DMEM+15% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HCT116 人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HEK293 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HEPG2 人肝癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HGC27 人胃癌細(xì)胞(未分化) DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HT-29   人結(jié)腸癌細(xì)胞 McCoy's 5A+10%FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        HUVEC 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 ECM 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        KYSE150 人食道癌細(xì)胞 RPMI-1640+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        L02(HL7702)(QSG-7701) 人正常肝細(xì)胞   RPMI-1640+20% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        LOVO 人結(jié)腸癌細(xì)胞 F12K+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        MCF-10A 人正常乳腺上皮細(xì)胞 DMEM/F12(1:1) 培養(yǎng)基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒+0.5ug/ml氫dddd松+5% 馬血清 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        MCF7    人乳腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        LX-2 人肝星狀細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        MDA-MB-468 人乳腺癌細(xì)胞 L-15+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣

        MIA Paca2 人胰腺癌細(xì)胞 DMEM+10% FBS 貼壁 上皮細(xì)胞樣 少量圓形懸浮

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