血清 你不能不知道的一些事情！

要做細(xì)胞培養(yǎng)，首先要了解的是，要用什么樣的血清。

普通的細(xì)胞培養(yǎng)，血清是*的，當(dāng)然啦，也有一些需要無(wú)血清培養(yǎng)。比如一些CIK細(xì)胞，不能用動(dòng)物源性的血清進(jìn)行培養(yǎng)，以免會(huì)輸?shù)饺梭w之后，導(dǎo)致產(chǎn)生異體免疫反應(yīng)。胎牛血清（FBS）是zui常用，也是的細(xì)胞生長(zhǎng)的補(bǔ)充試劑，通常優(yōu)于其他類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)血清。

主要是由于血清中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)以及細(xì)胞生長(zhǎng)因子，這些都是細(xì)胞生長(zhǎng)*的。那為啥不用成年牛的血清，或者新生牛的血清呢？很簡(jiǎn)單因?yàn)樘ヅｓw內(nèi)抗體含量低，不會(huì)造成與細(xì)胞的抗體的交叉反應(yīng)。一般胎牛都是取自奶牛場(chǎng)的小公牛，因?yàn)樗鼈儾粫?huì)產(chǎn)奶，好吧……

那問(wèn)題又來(lái)了，有時(shí)候會(huì)人的細(xì)胞養(yǎng)出一堆黑乎乎的顆粒，很多人管這個(gè)叫黑膠蟲(chóng)。但其實(shí)并沒(méi)有確定一定有黑膠蟲(chóng)這種生物，而且這玩意是呈布朗運(yùn)動(dòng)的，就是隨機(jī)的無(wú)規(guī)則運(yùn)動(dòng)。有很多人認(rèn)為可能這玩意是一種蛋白結(jié)晶，有的認(rèn)為這是一種原蟲(chóng)，但Google上是搜不到黑膠蟲(chóng)的。瓦特唉ver，這玩意兒會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

對(duì)于這個(gè)，有很多人認(rèn)為這個(gè)跟血清的產(chǎn)地有關(guān)系。為啥米國(guó)人要把血清分級(jí)啊，肯定是低級(jí)的引起了黑膠蟲(chóng)污染，也挺難說(shuō)到底是不是這樣的。嘛，那米國(guó)人為啥要給血清分級(jí)呢？因?yàn)槊讎?guó)農(nóng)業(yè)部（USDA）認(rèn)為，有個(gè)別國(guó)家沒(méi)有牛海綿狀腦病（BSE，就是瘋牛病啦）和口蹄疫（FMD），這些國(guó)家的FBS肯定要一些。這些沒(méi)有疫情的國(guó)家包括澳洲、北美洲和中美洲，但米國(guó)農(nóng)業(yè)部只允許新西蘭和加拿大的牛血清，在不進(jìn)行測(cè)試的情況下進(jìn)口到美國(guó)。其他國(guó)家，比如澳大利亞，墨西哥之類(lèi)的中美洲國(guó)家啥的，都需要檢測(cè)使命藍(lán)舌病毒、赤坂病毒等等。而南美洲被認(rèn)為是疫情嚴(yán)重地區(qū)，是堅(jiān)決不允許進(jìn)入米國(guó)市場(chǎng)的。

從世界動(dòng)物衛(wèi)生組織是政府間動(dòng)物衛(wèi)生技術(shù)組織OIE（http://www.oie.int/animal-health-in-the-world/official-disease-status/bse/list-of-bse-risk-status/）公布的數(shù)據(jù)來(lái)看，其實(shí)美國(guó)和加拿大本身都有BSE疫情，這也真的是蠻奇怪的，沒(méi)有BSE疫情的反而是一些南美國(guó)家包括：烏拉圭、哥倫比亞、巴拉圭、秘魯、巴西、阿根廷這些反而是沒(méi)有BSE疫情的地方，但米國(guó)就是這樣任性，說(shuō)什么也不進(jìn)口南美的。

但口蹄疫的疫情，南美更嚴(yán)重些。

澳洲的血清就更貴一些，為啥呢？因?yàn)榇蠹艺J(rèn)為澳洲的血清都是被隔離在大島上生產(chǎn)出來(lái)的，天然，純凈（沒(méi)有進(jìn)口牛），無(wú)污染。和奶粉一個(gè)道理……這樣的話(huà)，南美的血清就便宜到爆了。所以會(huì)有大批的商人，用南美血清，冒充澳洲血清。

那問(wèn)題來(lái)了，這樣的話(huà)會(huì)有什么樣的危害呢？

說(shuō)到危害，我們又要講一個(gè)概念，就是血清收集的方法以及血清制品的處理，zui關(guān)鍵的血清處理就在于過(guò)濾、去除內(nèi)毒素和血紅蛋白。血紅蛋白會(huì)對(duì)細(xì)胞有很大的影響，特別是培養(yǎng)干細(xì)胞，使用的血清的血紅蛋白含量必須≤10mg/dl，內(nèi)毒素含量也需要≤10EU/ml。過(guò)濾也需要使用從0.04μm至0.45μm范圍的濾器，一般來(lái)說(shuō)，0.04μm的濾器可以過(guò)濾掉基本所有的支原體和真菌細(xì)菌，但劣質(zhì)點(diǎn)的血清不會(huì)用這樣的濾器。這個(gè)的行業(yè)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)是用三個(gè)0.1μm的濾器來(lái)過(guò)濾。

的胎牛血清的指標(biāo)大概是這樣的：

1）血紅蛋白≤10mg/dl（≤20mg/dl的話(huà)也說(shuō)得過(guò)去的，記住FBS越紅越嗦，就是越紅越爛；顏色越淺，等級(jí)就越高）

2）內(nèi)毒素≤10EU/ml

3）總蛋白含量：30-40mg/ml（多了就不是胎牛了，可能是新生牛血清或者成年牛血清冒充的）

4）產(chǎn)地：澳洲>北美>中美>…>南美>國(guó)產(chǎn)（因?yàn)楹枚鄧?guó)產(chǎn)都是一字記之曰“亂來(lái)”）

質(zhì)量差的血清越容易出問(wèn)題。